细胞增殖
- 细胞增殖
- 细胞毒性
- 药物筛选
- 活性检测
效劳特色
金开瑞提供MTT/CCK-8检测效劳,可用于细胞增殖活性、细胞毒性检测;药物筛。òㄒ┪锛亮考案┦被纳秆,评价药物的清静性等);活性分子、918博天堂抗体、细胞因子等的活性检测。
效劳先容
金开瑞提供MTT/ CCK-8 Colony Forming检测效劳, 可用于细胞增殖活性、细胞毒性检测; 药物筛选 (包括药物剂量及给药时机的筛选, 评价药物的清静性 等);活性分子、918博天堂抗体、细胞因子等的活性检测。
效劳流程
客户提供
生长状态优异的实验细胞及细胞作育条件(冻存细胞需用干冰运输,作育细胞样品用装满作育液的作育瓶寄送,瓶口用封口膜封好);
需准确见告实验设计内容,如样本浓度等,并提供实验所需药物等。
最终交付
- 实验原始数据、图片、剖析效果;
- 实验流程及完整报告一份。
效劳说明
效劳项目 | 细分 | 效劳周期 (事情日) |
细胞增殖/细胞毒性 |
MTT |
12 |
CCK8 |
||
Colony Forming |
30-35 |
案例展示
常见问题与剖析 (Q&A)
细胞增殖相关实验包括有MTT/CCK8、EdU掺入、(软琼脂)克隆形成和细胞周期检测。 MTT/CCK8:一样平常在基因表达水平干预、细胞因子或药物干预等条件下,作育细胞后加入MTT/CCK8,反应的是细胞总体代谢活力水平,通过多孔板光度计(酶标仪)获取数值,可绘制细胞的生长曲线。 EdU掺入:在细胞作育历程中EdU,通过DNA合成水平,反应细胞增殖状态及比例,后续通过荧鲜明微镜或流式细胞仪获取数据。 (软琼脂)克隆形成:差别干预处置惩罚的细胞,在作育孔板中或铺有低熔点琼脂糖的作育孔板中,作育2周左右视察其形成单克隆的能力。软琼脂克隆形成主要用于悬浮细胞,或者在研究贴壁细胞的抗失巢凋亡(anoikis)能力时。 细胞周期:实验细胞经由PI染色后,举行流式细胞术剖析,可以获得细胞在各个细胞周期(G1/G2/M)的漫衍比例。
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1、 有哪些检测细胞增殖的要领?
在细胞增殖检测中,MTT、CCK-8和Colony Forming是常用的要领之一。它们都有各自的优势和适用规模,因此使用频率相对较高。
MTT测定和CCK-8测定是常用的间接评估细胞增殖活性的要领,特殊适用于高通量筛选和快速获得效果。它们在细胞代谢活性的评估方面较量利便,因此在许多实验中被普遍接纳。
Colony Forming实验则用于评估细胞的克隆天生能力和增殖能力,通过直接视察和计数形成的细胞集落来推断细胞增殖能力。这种要领在研究细胞增殖能力和克隆性方面更为直接,常用于细胞生物学和肿瘤学研究中。
其他的细胞增殖检测要领如BrdU标记、Ki-67免疫染色、流式细胞术和细胞计数等也在特定的研究领域和实验中获得普遍应用。
总体而言,选择使用哪种要领取决于研究的目的、细胞类型、实验条件以及实验室的偏好。差别的要领可以提供差别的信息和实验效果,以是在设计实验时需要综合思量种种因素。
2、 细胞增殖检测要领的先容和优劣势比照
要领 |
原理 |
优势 |
劣势 |
MTT测定 |
细胞将MTT溶液还原为紫色结晶体, 通过消融和丈量吸光度评估细胞增殖活性 |
简朴、本钱低、适用于高通量筛选 | 不可直接确定细胞数目,耗时 |
CCK-8测定 |
细胞将CCK-8溶液中的染料还原为有颜色的产品, 通过丈量吸光度评估细胞增殖活性 |
快速、轻盈、适用于高通量筛选 | 不可直接确定细胞数目,对少量细胞可能不敏感 |
Colony Forming | 细胞形成集落,通过计数集落数目评估细胞增殖能力 | 直接评估细胞克隆天生能力和增殖能力 | 较长作育时间,依赖细胞克隆天生能力 |
BrdU标记 |
细胞在作育基中摄取BrdU, 通过检测BrdU保存来评估正在举行DNA复制的细胞 |
直接标记正在举行DNA复制的细胞 | 需要特定抗体,不可区分细胞阶段 |
Ki-67免疫染色 | 检测细胞中Ki-67918博天堂的表达,其在细胞增殖历程中高表达 | 直接标记正在举行细胞增殖的细胞 | 不可区分细胞阶段,依赖特定抗体 |
流式细胞术 | 使用流式细胞仪检测细胞数目、巨细和DNA含量等参数 | 快速、可获取多个参数信息 | 对装备要求较高,需要单个细胞悬浮 |
细胞计数 | 通过显微镜视察和手工计数细胞数目来确定细胞增殖 | 直接计数细胞数目 | 耗时,适用于少量细胞和小作育皿 |
3、 当涉及到细胞增殖检测要领的使用时,一些常见的研究领域和实验应用的示例
①肿瘤学研究:
? TT测定:评估肿瘤细胞系对抗肿瘤药物的敏感性和抗药性。
? Colony Forming:评估肿瘤干细胞的克隆天生能力和增殖能力。
? Ki-67免疫染色:检测肿瘤组织中Ki-67的表达水平,评估肿瘤细胞的增殖活性。
②药物筛选和毒性研究:
? CCK-8测定:举行高通量筛选,评估化合物对细胞增殖的影响。
? 流式细胞术:测定细胞周期漫衍,判断药物对细胞周期的影响。
? MTT测定:评估药物或化合物的细胞毒性作用。
③组织工程和再生医学:
? Colony Forming:评估干细胞的增殖和分解能力,用于组织工程和再生医学研究。
? 细胞计数:盘算细胞数目以确定组织工程支架的细胞莳植密度。
④免疫学研究:
? BrdU标记:标记正在举行DNA复制的免疫细胞,评估免疫细胞增殖活性。
? Ki-67免疫染色:检测免疫细胞中Ki-67的表达,评估其增殖能力和激活状态。
这些只是一些示例,现实上在各个研究领域和实验中可以使用差别的细胞增殖检测要领。选择合适的要领需要思量研究问题、细胞类型和实验条件等因素,并凭证实验目的举行决议。