DNA测序
- 大规模测序
- 快速稳固
- PAGE纯化
效劳特色
金开瑞测序平台应用ABI 3730XL测序平台,可为您提供快速稳固的测序效劳。
效劳先容
DNA测序是指对DNA分子的核苷酸序枚举行剖析和测定的历程。DNA测序手艺已经普遍应用于基因组学、生物学、医学、农业、情形科学等领域,为研究职员提供了研究生物体结构和功效的主要手段。现在,第一代DNA测序手艺的泛起,使得测序速率和准确度获得了大幅提升,有望进一步推动生命科学领域的研究和生长。
效劳优势
- 速率更快:PCR产品和质粒24h内发送测序效果,菌液样本48h内发送测序效果;
- 测序更专业:正常样品有用测序长度可达800bp,测难度序列乐成率高,品质有包管;
- 效劳更知心:武汉三镇驻点,随时上门取样,24h售前售后效劳,实时解决您的任何问题;
- 运动更富厚:不中止推出种种惊喜运动,详情请咨询区域销售司理。
效劳流程
客户提供
测序信息单,测序样品(包括菌液、质粒、PCR产品)和测序引物。
最终交付
- 测序效果,包括1份ab1名堂的图谱文件和1份seq名堂的序列文件
效劳说明
效劳内容 |
细分 | 效劳周期 |
菌液测序/质粒测序/ PCR产品测序 |
<10反应 |
1-2事情日 |
≥10反应 |
1-2事情日 | |
≥100反应 |
2-3事情日 | |
大规模测序 |
2-3事情日 | |
设计合成测序引物 | 合成量2OD,PAGE 纯化 | 1-2事情日 |
案例展示
常见问题与剖析 (Q&A)
消融DNA测序样品时,用灭菌蒸馏水消融最好。DNA的测序反应也是Taq酶的聚合反应,需要一个最佳的酶反应条件。若是DNA用缓冲液消融后,在举行测序反应时,DNA溶液中的缓冲液组份会影响测序反应的系统条件,造成Taq酶的聚合性能下降。 ??有许多客户在消融DNA测序样品时使用TE Buffer。简直,TE Buffer能增添DNA样品生涯时代的稳固性,并且TE Buffer对DNA测序反应的影响也较小,但凭证918博天堂履历,我们照旧推荐使用灭菌蒸馏水来消融DNA测序样品。
我们推荐客户提供菌体,由我们来提取质粒,这样DNA样品较量稳固。若是您可以提供DNA样品,我们也很接待,但一定要注重样品纯度和数目。若是提供的DNA量不敷,我们就需要对证粒举行转化,此时需收取转化费。有些质粒提取法提取的DNA质量很好,象TaKaRa、Qiagen、Promega的质粒制备试剂盒等。 ??提供的测序样品为PCR产品时,特殊需要注重DNA的纯度和数目。PCR产品必需举行切胶接纳,不然无法获得优异的测序效果。 ??有关DNA测序样品的详细情形请严酷参照"测序样品的提供"部分的说明。
若是DNA片断在载体上,可以用载体上两头的引物同时测序,让其中心交织互补,便可完全测通。若是这样还读欠亨,可凭证已经测出的序列设计测序引物作进一步测序(此称为Primer Walking法),便可完全测通。
相关资源
1、高通量测序手艺如新一代测序(Next-Generation Sequencing, NGS)已经日趋成熟,Sanger测序(一代测序)为什么没有被完全取代?
Sanger测序的准确性和可靠性使其成为这些特定应用领域的首选要领之一。只管在大规;蜃椴庑蛑幸丫恍乱淮庑蚴忠杖〈,但Sanger测序在需要高度准确性和可靠性的实验中仍然施展着主要作用。例如:
● 基因克。篠anger测序常用于基因克隆中的序列验证。在构建基因工程载体或插入DNA片断时,需要确认目的序列的准确性和准确性。
● 突变检测:Sanger测序可以用于检测DNA序列中的点突变、插入缺失或重排等突变。它在研究遗传性疾病、癌症突变剖析和个体基因组剖析中具有主要作用。
● Sanger验证:在新一代测序(NGS)等高通量测序手艺中,由于其可能保存的过失率,Sanger测序通常被用作验证要领。通过对特定区域举行Sanger测序,可以确认高通量测序效果的准确性。
2、Sanger测序(链终止法测序)和新一代测序手艺比照先容
分类 |
Sanger测序 |
新一代测序手艺 |
原理 |
链终止法测序,通过合成链终止的核苷酸来确定DNA序列 |
并行测序原理,同时测序数百万至数十亿个片断 |
事情流程 |
DNA模板制备、引物设计、PCR扩增、测序、电泳疏散、数据剖析 |
DNA样本制备、文库构建、测序、数据剖析 |
读长 |
较长(通常800-1,000个碱基对),适用于较小的DNA片断 |
较短(通常数十到数百个碱基对),适用于整个基因组的测序 |
产出 |
相对较低,单个测序仪器产出数百到数千个片断 |
高,单次测序可产出数百万至数十亿个片断 |
本钱 |
相对较高,包括装备、试剂和人力本钱 |
相对较低,高通量平台降低了测序本钱 |
应用 |
适用于特定应用,如基因克隆、突变检测、Sanger验证等 |
适用于全基因组测序、转录组测序、表观遗传学等普遍应用 |
优势 |
可以获得较长的读长,序列质量较高 |
高通量、高效率、适用于大规模测序和多样天职析 |
局限性 |
产出量相对较低,不适用于大规模测序项目 |
读长较短,可能保存测序过失和序列重叠的问题 |