ELISA可以用来检测样本中特定918博天堂或细胞因子含量
，同样也是可以用来检测外泌体中一些标记性918博天堂
。ELISA试剂盒检测的样本是有多种类型的
，如血清、血浆、尿液、细胞作育上清或组织匀浆液等
，关于差别的样本
，前期的处置惩罚方法也是差别的
， 关于ELISA实验的来说
，实验样本的处置惩罚很是要害
。在处置惩罚历程中
，使提取溶剂与容器内的样品充分接触以深入到样本组织内部
，提取待测因素
。在净化历程中加入的溶剂
，可能会降低待测组分的浓度或者不相宜直接剖析
，需要去除所有有机溶剂
。同时要对只管去除待测样本中的杂质
，以防滋扰实验效果
。

正常情形下
，血清中外泌体的含量照旧很高的
。一样平常通例实验血清纯化外泌体
，建议可以先对外泌体举行判断
，通过电镜检测视察一下外泌体的是否具有杯状结构
，然后通过NTA检测一下粒径巨细和粒径浓度
，确定没问题举行再举行WB验证
。 WB实验失败的一些缘故原由：（1）抗体染色不充分
，可以增添抗体浓度
，延伸孵育时间举行改善
。（2）检查酶是否失活
，可以直接将酶和底物举行混淆
，若是不显色则说明酶失活了
。选择在有用期内、有活性的酶联物
。（3）可以增添阳性比照
，若是阳性比照有用果
，但标本没有
，则可能是标本中不含靶918博天堂或靶918博天堂含量太低
？梢栽鎏肀瓯旧涎拷饩霭918博天堂含量低的缘故原由
。（4）检查抗体是否失效
，看抗体是否逾期
，事情液只管现配现用
。

现在外泌体918博天堂提取的要领相对较少
，有的可以通过购置试剂盒来购置提取外泌体918博天堂
。在一篇专利中提到怎样提取血清中的外泌体
，专利申请号：CN201810287204.6 专利名称：提取外泌体及外泌体918博天堂的要领 提取外泌体要领办法：所得含有外泌体的质料(即洗涤后的沉淀)置于冰上
，向其中加入18μL4g/100mL的SDS水溶液
，然后超声(超声条件在100W下举行)裂解20分钟
，获得超声产品；将超声产品在16000g下离心5分钟
，网络所有上清液；向上清液中加入82μL 8M尿素水溶液和二硫苏糖醇
，获得裂解液
，该裂解液中二硫苏糖醇的浓度为20mmol/L；将该裂解液在37℃孵育4小时
，获得裂解产品；将裂解产品转移至FASP管中
，用8M尿素水溶液洗涤(FASP管是一种按分子量截留的管
，洗涤历程都是通过离心完成
，离心条件为14000g离心10分钟
，离心以后
，绝大部分溶液和小分子物质被离心至下层吸收管子里
，外泌体被截留在上层的FASP管中)2次；然后加入碘乙酰胺(终浓度50mmol/L)
，室温下避光反应1小时
，用50mM碳酸氢铵水溶液洗涤3次
，加入1μg胰918博天堂酶
，37℃酶切12小时
，将所得溶液45℃热干
，用0.1％(v/v)甲酸水溶液定容
，获得外泌体918博天堂提取液
，将外泌体918博天堂提取液上样举行LC-MS/MS剖析
，上样量为1μg
。所得含有外泌体的质料(即洗涤后的沉淀)置于冰上
，向其中加入18μL4g/100mL的SDS水溶液
，然后超声(超声条件在100W下举行)裂解20分钟
，获得超声产品；将超声产品在16000g下离心5分钟
，网络所有上清液；向上清液中加入82μL 8M尿素水溶液和二硫苏糖醇
，获得裂解液
，该裂解液中二硫苏糖醇的浓度为20mmol/L；将该裂解液在37℃孵育4小时
，获得裂解产品；将裂解产品转移至FASP管中
，用8M尿素水溶液洗涤(FASP管是一种按分子量截留的管
，洗涤历程都是通过离心完成
，离心条件为14000g离心10分钟
，离心以后
，绝大部分溶液和小分子物质被离心至下层吸收管子里
，外泌体被截留在上层的FASP管中)2次；然后加入碘乙酰胺(终浓度50mmol/L)
，室温下避光反应1小时
，用50mM碳酸氢铵水溶液洗涤3次
，加入1μg胰918博天堂酶
，37℃酶切12小时
，将所得溶液45℃热干
，用0.1％(v/v)甲酸水溶液定容
，获得外泌体918博天堂提取液
，将外泌体918博天堂提取液上样举行LC-MS/MS剖析
，上样量为1μg
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