修饰/标记引物
- 质量包管
- 快速交付
- 效劳周密
效劳特色
金开瑞具备强盛的引物合成能力，可快速为您合成高质量通俗引物；同时还可提供多种类的引物修饰、标记效劳。
*您也可以下载“引物合成订购表”并凭证要求填写发送邮件至oligo@genecreate.com
效劳先容
修饰/标记引物是指在通俗引物的基础上，通过添加特定的化学修饰或荧光标记来增强PCR反应的特异性和检测迅速度。常见的引物修饰形式包括有磷酸化、生物素、地高新、内部氨基修饰、5’氨基修饰、3’氨基修饰等，可用于种种非放射性免疫剖析、杂交反应。这些修饰/标记可以使引物与目的DNA序列更细密团结，增添PCR反应的特异性和选择性，同时也可以使扩增产品在后续的检测历程中更易于检测和剖析。修饰/标记引物普遍应用于病原体检测、基因型判断、基因表达剖析等领域，为科学家们提供更准确、高迅速度的分子生物学工具。
效劳优势
- 富厚的引物修饰/标记类型，大规模测序验证平均突变率低于1/1000
- 严酷执行ISO 9001和ISO 13485统一质控标准，产品历程可追溯性强，批次纪录完善
- 多种纯化方法可供选择，按需定制化种种规格、发货形式和特殊引物合成
- 便捷完善的引物合成在线订购系统，履历富厚引物合成专家团队和手艺支持
效劳流程
客户提供
引物合成订购表
需详细填写客户信息、序列、碱基数、纯化方法等信息
最终交付
- 对应合成量的标记/修饰引物冻干粉
- 引物操作说明书。
效劳说明
| 修饰碱基 | ||
| 分类 | 修饰种类 | 纯化方法 |
| 有数碱基 | dI | PAGE |
| dU | PAGE | |
| 硫代修饰 | Phosphorthioate | PAGE |
| 磷酸基团 | 5'PO4 | HPLC |
| 氨基 | 5' NH2 C6 | HPLC |
| 3' NH2 C7 | HPLC | |
| 巯基 | 3' SH C6 | HPLC |
| 5' SH C6 | HPLC | |
| 生物素(Biotin) | 5' Biotin | HPLC |
| 3' Biotin | HPLC | |
| 荧光基团 (Fluorophores) | 5' Cy3 | HPLC |
| 5' Cy5 | HPLC | |
| 5' FAM | HPLC | |
| 3' FAM | HPLC | |
| 5' HEX | HPLC | |
| 5' TET | HPLC | |
| 5' Rox | HPLC | |
| 5' TAMRA | HPLC | |
| 3' TAMRA | HPLC | |
| 3' BHQ 1 | HPLC | |
| 3' BHQ 2 | HPLC | |
| 3`Dabcyl | HPLC | |
| 双标 | 5' FAM-3' TAMRA | HPLC |
| 5' FAM-3' BHQ1 | HPLC | |
| 5' FAM-3' BHQ2 | HPLC | |
| 5' FAM-3' Dabcyl | HPLC | |
| 5' HEX-3' TAMRA | HPLC | |
| 5' HEX-3' BHQ1 | HPLC | |
| 5' HEX-3' BHQ2 | HPLC | |
| 5' HEX-3' Dabcyl | HPLC | |
| 5' TET-3' TAMRA | HPLC | |
| 5' TET-3' BHQ1 | HPLC | |
| 5' TET-3' BHQ2 | HPLC | |
| 5' TET-3' Dabcyl | HPLC | |
| 5'Cy3-3' BHQ2 | HPLC | |
| 5'Cy5-3' BHQ2 | HPLC | |
| 其它 | 请咨询 | |
案例展示
相关资源
1、 常见的引物修饰和标记的先容及应用
|
修饰/标记类型 |
形貌 | 应用领域 |
| 荧光标记引物 | 引物上毗连荧光染料或荧光物质，用于可视化实验 | 荧光PCR、原位杂交、荧光探针手艺等 |
| 生物素标记引物 | 引物上毗连生物素分子，用于亲和素-双亲和素系统的富集或检测 | 生物素-链酶扩增法（Biotin-ELISA）等 |
| 磷酸化引物 | 引物中引入磷酸化基团，增强与酶的团结能力 | PCR扩增、DNA测序等 |
| 逆转录引物 | 用于逆转录反应，将RNA转录成cDNA的引物 | RT-PCR、基因表达剖析等 |
| 锚定引物 | 引物上引入锚定序列，用于PCR扩增后的测序特异性团结或适配体毗连 | 测序、基因组拼接等 |
| 化学修饰引物 | 引物上引入化学修饰基团，如甲基化、磷酸化或其他修饰 | DNA甲基化剖析、DNA交联实验、荧光共振能量转移（FRET）等实验 |
2、在修饰/标记引物合成历程中，常见的实验难点及解决计划
①引物纯度和质量控制：
● 使用高纯度的试剂和质料。
● 选择适当的合成要领和纯化手艺，如薄层凝胶电泳、高效液相色谱等。
● 举行质量控制检测，如质谱剖析、DNA浓度丈量等。
②引物修饰效率和位置：
● 优化修饰反应条件，包括修饰试剂浓度、反应时间和温度。
● 选择合适的修饰化学反应或酶法。
● 举行修饰效率的评估和验证。
③引物稳固性和贮存：
● 选择稳固的修饰或标记化学基团。
● 存储引物在适当的条件下，如低温顺干燥情形。
● 按期检查引物的稳固性和活性。
④引物特异性和选择性：
● 优化引物设计，包括序列选择、引物长度和碱基组成。
● 使用引物设计软件举行特异性剖析和评估。
● 举行引物的特异性验证实验，如PCR扩增和测序剖析。
⑤引物使用前的测试：
● 举行引物的特异性验证实验，如PCR扩增和测序剖析。
● 举行引物的功效性验证实验，如团结实验、放射性标记实验等。
● 使用引物设计软件举行理论剖析和展望引物的性能。
3、在修饰/标记引物的设计和剖析历程中，有哪些在线工具可以辅助研究职员举行操作和剖析
● IDT OligoAnalyzer：由Integrated DNA Technologies (IDT) 提供的工具，用于评估引物的物理特征，如溶化温度、GC含量和二级结构等。网址：idtdna.com/calc/analyzer
● Primer3：用于引物设计的普遍使用的工具，可以凭证指定的参数自动设计引物，如引物长度、溶化温度规模和目的序列要求等。网址：bioinfo.ut.ee/primer3-0.4.0/
● UCSC In-Silico PCR：通过在基因组数据库中举行模拟PCR来评估引物的特异性，资助确定引物是否会扩增非特异性产品。网址：genome.ucsc.edu/cgi-bin/hgPcr
● NCBI Primer-BLAST：由美国国家生物手艺信息中心 (NCBI) 提供的工具，用于设计引物和评估其特异性，可以与NCBI数据库举行比对剖析。网址：ncbi.nlm.nih.gov/tools/primer-blast/
● DNAWorks：用于设计引物和评估引物性能的工具，可以举行引物设计、优化和评估引物的特异性和稳固性。网址：helixweb.nih.gov/DNaworks/
● NEBuilder Assembly Tool：由New England Biolabs提供的在线工具，用于设计和优化DNA片断的引物，并举行引物的限制酶消化和毗连设计。nebuilder.neb.com
