通俗引物
- 越日交付
- 多种纯化方法
- 工艺更稳固
效劳特色
金开瑞拥有现在主流的Dr.oligo192高通量引物合成仪、专业的手艺职员及成熟的合成纯化要领,可提供高质量、多种类的引物合成效劳。RPC、PAGE、HPLC等多种纯化方法,包管质量和实时的交货时间,武汉地区越日即可交付。
效劳先容
通俗引物是指在PCR反应中作为指导DNA扩增的引物,通常由18-25个碱基组成,可以与目的DNA序列特异性团结,并提供DNA聚合酶催化合成新DNA链所需的3'端。通俗引物通常用于通例PCR反应中,包括基因表达剖析、病原体检测、基因型判断等应用。通俗引物的合成和设计非经常见和标准化,通?梢栽谝锟庵姓业较殖傻囊,也可以凭证需要定制合成,具有本钱低、操作轻盈等优点。引物合成可用于PCR、测序、全基因合成、亚克隆、点突变、载体构建、RNA滋扰和基因重组等实验。凭证差别的用途,可选择差别的纯化方法。
效劳优势
- 先进:接纳天下上先进的合成仪制造商BLP 公司生产的nm级别的Dr.oligo192高通量DNA合成仪,使引物合成更快速、更清静、更稳固;
- 快速:3h内可以合成192条30个碱基以内的引物;通例RPC、DSL、OPC纯化引物24h内发货,武汉地区越日即可交付;
- 清静:接纳气相氨解的原理,刷新的氨解方法,可以在90min内使引物氨解的更快更完全,并且阻止由于其他试剂氨解带来的不须要的突变;
- 优质:多种纯化方法,多重质量检测手段(HPLC、MS),周全包管我们发货的质量。
效劳流程
客户提供
引物合成订购表:需详细填写客户信息、序列、碱基数、纯化方法等信息。
最终交付
- 对应合成量的引物冻干粉;
- 引物操作说明书。
效劳说明
纯化方法 | 引物长度 | 产量(OD) | 发货时间 |
RPC纯化 | 8-15nt |
1-2 |
1事情日 |
2-4 | 1事情日 | ||
15-59nt |
1-4 |
1事情日 | |
5-10 | 1事情日 | ||
10-15 | 1事情日 | ||
15-20 | 1事情日 | ||
>20 | 1事情日 | ||
60-120nt | 1-2 | 3事情日 | |
2-5 | 3事情日 | ||
>5 | 3事情日 | ||
PAGE纯化 | 15-59nt |
1-2 |
3事情日 |
3-4 | 3事情日 | ||
5-8 | 3事情日 | ||
>8 | 3事情日 | ||
60-80nt | 1-2 | 3事情日 | |
3-4 | 3事情日 | ||
5-8 | 3事情日 | ||
>8 | 3事情日 | ||
80-100nt | 3 | 3事情日 | |
3 | 3事情日 | ||
3 | 3事情日 | ||
>8 | 3事情日 | ||
100-120nt | 1 | 3事情日 | |
2 | 3事情日 | ||
HPLC纯化 | 8-15nt |
1-2 |
3-5事情日 |
3-4 | 3-5事情日 | ||
15-59nt | 1-4 | 3-5事情日 | |
5-8 | 3-5事情日 |
常见问题与剖析 (Q&A)
两条引物退火乐成率达不到百分之百,内里会保存单链引物,引物退火后跑胶有杂链很正常,不可以此来判断单链引物纯度。
基因合成,尤其是难度基因和长片断基因,有可能造成延期,因此我们只能包管绝大大都基因按期交付。关于延期项目,918博天堂手艺支持会给您实时汇报希望。现在并没有任何公司包管延期后减免用度
相关资源
1、引物合成实验中的专属名词及诠释
● Oligo(Oligonucleotide):Oligo是指短链的寡聚核苷酸,通常由20到200个碱基组成。在引物合成实验中,引物往往是一种特定长度的oligo。
● 反向合成(Reverse Synthesis):在引物合成实验中,反向合成指从3'端到5'端逐个加入核苷酸单位,合成引物的历程。
● 脱;ぃ―eprotection):在引物合成中,引物的核苷酸单位通常被;せ疟;,以避免在反应历程中爆发意外的化学反应。脱;な侵溉コ庑┍;せ诺睦,使得引物的核苷酸单位可用于进一步的化学反应。
● HPLC(High-Performance Liquid Chromatography):高效液相色谱法,一种常用的疏散和纯化手艺,可用于疏散和纯化合成的引物。
● PAGE(Polyacrylamide Gel Electrophoresis):聚丙烯酰胺凝胶电泳法,一种常用的DNA片断剖析手艺,可以用于评估引物的纯度和巨细。
2、引物的生涯与使用注重事项
● 引物生涯的注重事项:
? 贮存温度:将引物贮保存干燥的条件下,通常在-20°C或更低的温度下。阻止频仍的冻融循环,由于这可能导致引物的降解。
? 避光;ぃ阂镉χ4姹芄獾奶跫下,以避免光照引发的降解反应。使用不透明的冷冻管或管盒来;ひ。
? 防潮防湿:确保引物贮存情形干燥,阻止湿气的进入?梢允褂酶稍锛粱蛎芊庑杂乓斓闹嫒萜骼幢苊馐秩。
● 引物使用的注重事项:
? 引物质量控制:在使用引物之前,举行引物的质量控制验证,如测序确认引物序列的准确性或质谱剖析验证纯度。
? 合理稀释:凭证实验需求,合理稀释引物至适当的事情浓度。确保稀释历程中的准确度和标记清晰度。
? 准确温度:在实验中,凭证引物的要求和扩增反应的最佳温度,严酷控制反应温度。阻止凌驾引物的最大耐受温度。
? 阻止污染:使用无菌手艺和无菌操作条件,阻止引物受到外源性的污染。使用专用的无菌手艺器材和操作区域。
? 单次使用:为阻止引物的降解和污染,一次性使用所需量的引物,并阻止重复冻融。
3、引物合成的实验举例
● PCR(聚合酶链式反应):PCR是一种常用的基因扩增手艺,引物在PCR反应中用于选择性地扩增目的DNA序列。
● 实时定量PCR(qPCR):qPCR用于准确丈量目的DNA或RNA的数目,引物在qPCR实验中用于扩增目的序列并举行定量剖析。
● DNA测序:引物在DNA测序中用于扩增待测序列的片断,以便举行测序反应。
● RNA pull-down:RNA pull-down实验用于研究RNA与918博天堂质的相互作用。引物在该实验中用于捕获目的RNA分子,并与其团结的918博天堂质一起纯化和剖析。
● 基因突变剖析:引物在基因突变剖析中用于扩增目的基因的特定区域,以便举行突变检测和剖析。
● 基因克。阂镌诨蚩寺≈杏糜诶┰瞿康幕虻奶囟ㄇ,以便将其插入到表达载体或矢量中。
● 限制性片断长度多态性(RFLP)剖析:引物在RFLP剖析中用于扩增目的基因的特定区域,以便举行限制性酶切并剖析差别基因型的片断长度差别。
4、用于引物合成设计、剖析和操作的在线工具简介
● Primer3 :Primer3常用的在线引物设计工具,可以凭证用户提供的目的序列信息,自动设计适合的引物序列,并提供引物参数和特征剖析。(primer3.ut.ee)
● IDT SciTools :IDT SciTools提供了多个在线工具,包括引物设计、引物剖析、序列优化和酶切位点剖析等。其中包括了引物设计、Tm值盘算、二聚体结构展望等功效。(idtdna.com/pages/tools)
● OligoAnalyzer:OligoAnalyzer是IDT提供的在线工具,用于剖析引物的理化特征,包括Tm值、二聚体结构、GC含量、最后稳固性等。(idtdna.com/pages/tools/oligoanalyzer)
● NCBI Primer-BLAST:NCBI Primer-BLAST是由国家生物手艺信息中心(NCBI)提供的在线工具,用于引物设计和特异性剖析。它可以设计引物,并对其在基因组中的特异性举行评估。(ncbi.nlm.nih.gov/tools/primer-blast/)
● UCSC In-Silico PCR:UCSC In-Silico PCR是UCSC基因组浏览器提供的在线工具,可以通过输入引物序列,在基因组上举行虚拟PCR,并可视化PCR产品的位置。(genome.ucsc.edu/cgi-bin/hgPcr)
● SnapGene:SnapGene是一款商业软件,提供了在线版本和桌面版本。它可以用于引物设计、序列编辑、限制性酶切模拟和克隆操作等。在线版本允许用户举行一些基本的引物设计和序列剖析操作。(snapgene.com)