细胞迁徙及侵袭
- 细胞迁徙
- 细胞侵袭
- Transwell
- 趋化因子
- 透明质膜孔板
效劳特色
Transwell实验是一种常用的细胞迁徙和侵袭能力评估要领 ，通过透明质膜孔板模拟体内情形 ，提供简朴易行、可定量丈量和高可重复性等特色 ，普遍应用于细胞迁徙和侵袭研究。
效劳先容
Transwell是一类有通透性的杯状的装置 ，放入作育板后 ，分为两室：Transwell小室内称上室 ，艳服上层作育液；作育板内称下室 ，艳服下层作育液。上下层作育液以聚碳酸酯膜相隔 ，以此研究下层作育液中的因素对细胞生长、运动等的影响。Transwell检测手艺效劳 ，用于测定细胞迁徙及侵袭。
效劳优势
- 简朴易行：Transwell实验操作相对简朴 ，不需要重大的装备和手艺 ，降低了实验的难度和门槛。
- 可定量丈量：Transwell实验可以通过染色或其他要领准确丈量下室中迁徙或侵袭的细胞数目 ，提供可靠的数据支持 ，便于对细胞迁徙和侵袭能力举行定量剖析。
- 高可重复性：透明质膜孔板具有一致的微孔结构 ，包管实验的重复性和可比性 ，镌汰实验误差 ，使得实验效果更具可信度。
- 模拟体内情形：Transwell实验中透明质膜孔板模拟细胞在体内组织间迁徙和侵袭的心理情形 ，有助于更真实地研究细胞行为和心理历程。
- 无邪性强：Transwell实验可凭证研究需要选择差别孔径的透明质膜孔板 ，适用于差别细胞类型和研究工具 ，具有较大的无邪性。
- 适用于高通量筛。篢ranswell实验可以批量举行 ，适用于高通量筛选药物或影响细胞迁徙、侵袭的因素 ，提高了实验的效率和产出。
效劳流程
客户提供
生长状态优异的实验细胞及细胞作育条件（冻存细胞需用干冰运输 ，作育细胞样品用装满作育液的作育瓶寄送 ，瓶口用封口膜封好）；
需准确见告实验设计内容 ，如样本浓度等 ，并提供实验所需药物等。
最终交付
- 实验原始数据、图片、剖析效果；实验流程及完整报告一份
效劳说明
| 效劳项目 | 细分 | 注释 | 效劳周期（事情日） |
| 细胞迁徙/细胞侵袭 | Transwell（不必Matrigel） | 用于检测细胞迁徙 | 12 |
| Transwell（用Matrigel） | 用于检测细胞侵袭 |
案例展示
常见问题与剖析 (Q&A)
Transwell小室上下层由聚碳酸酯膜脱离 ，膜上有3-8μm差别规格孔径的小孔。不铺Matrigel胶时细胞的穿膜历程体现其迁徙能力；寺库有Matrigel胶时细胞穿膜需渗透基质金属918博天堂酶（MMPs）等基质水解酶类 ，此时体现的是细胞的侵袭能力。所得数据为显微镜下照相及细胞计数效果。
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1、Transwell实验办法
● 预处置惩罚透明质膜孔板：将透明质膜孔板浸泡在适当的溶液中 ，如无菌PBS或细胞作育基 ，去除可能的残留物质 ，确保透明质膜孔板的清洁和无菌。
● 细胞处置惩罚：将需要研究的细胞疏散成单细胞悬浮液 ，凭证实验需要 ，可预处置惩罚细胞 ，例如袒露于趋化因子或药物。
● 上室孔板装配：将预处置惩罚后的细胞悬浮液加入透明质膜孔板的上室 ，注重控制细胞数目和浓度 ，确保匀称漫衍。
● 下室孔板装配：在透明质膜孔板的下室中加入响应的作育基 ，通常含有趋化因子或其他试剂 ，以吸引细胞迁徙或侵袭。
● 孔板作育：将上下室装配的透明质膜孔板置于细胞作育箱中 ，举行作育 ，凭证研究需要 ，可以调理作育时间。
● 细胞牢靠和染色：作育竣事后 ，取出透明质膜孔板 ，将细胞牢靠 ，通常使用甲醛或乙醇等 ，然后举行染色。
● 细胞视察和计数：视察透明质膜孔板上下室中的细胞 ，凭证实验目的选择适当的染色要领举行细胞计数或其他定量剖析。
● 数据剖析：凭证实验效果举行数据统计和剖析 ，较量差别组别的细胞迁徙或侵袭能力。
Transwell实验可以凭证研究目的举行适当的调解和刷新 ，实验办法可能会因详细实验设计而有所差别。
2、研究细胞迁徙和侵袭的要领比照先容
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要领名称 |
简介 |
优点 |
试用规模 |
局限性 |
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Transwell实验 (透明质膜孔板法) |
通过透明质膜孔板模拟细胞迁徙和侵袭 ，定量丈量细胞数目 |
定量化丈量细胞数目 ，高通量筛选 |
适用于体外细胞迁徙和侵袭评估 ，高通量筛选等 |
无法模拟组织间的重大情形 ，不适用于体内实验 |
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Scratch实验 (划痕实验) |
在细胞作育皿中形成划痕 ，视察细胞填充划痕的能力 |
简朴易行 |
适用于起源评估细胞迁徙能力 ，简朴易行 |
无法模拟体内情形 ，只能提供定性信息 |
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Boyden室外实验 (Boyden室外迁徙实验) |
使用孔板上下两室的梯度形成细胞迁徙差别 ，评估细胞迁徙能力 |
相对简朴 ，不需要特殊装备 |
适用于体外细胞迁徙评估 ，操作相对简朴 |
不适用于定量丈量 ，无法模拟重大的体内情形 |
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3D细胞迁徙模子 (三维细胞迁徙模子) |
使用三维结构模拟细胞迁徙 ，贴近体内情形 |
贴近体内情形 ，更贴近真真相形 |
适用于模拟重大的心理情形 ，更贴近体内情形 |
实验办法重大 ，需要特殊装备 ，较为耗时 |
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软琼脂膜法 (软琼脂孔板法) |
在琼脂膜上作育细胞 ，视察细胞在软质基质上的迁徙能力 |
适用于生物力学研究 ，模拟软组织情形 |
只能提供定性信息 ，不适用于定量丈量 |
需要特殊琼脂膜基质和作育条件 |
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体内实验 |
使用动物模子研究细胞迁徙和侵袭历程 ，具有较高的生物学相关性 |
较高的生物学相关性 ，模拟重大致内情形 |
适用于研究细胞在重大致内情形下的行为 |
涉及动物实验 ，保存伦理和规则限制 ，用度较高 |
3、Transwell的应用举例
● 癌症研究：Transwell可用于评估癌细胞的侵袭和转移能力 ，研究肿瘤转移机制和药物干预。例如 ，通过在Transwell上层作育癌细胞 ，并在下层添加模拟肿瘤组织的基质 ，可以模拟肿瘤细胞侵袭历程 ，并评估抑制剂对侵袭的影响。
● 免疫学研究：Transwell可用于研究细胞迁徙和细胞-细胞相互作用对免疫细胞活性的影响。例如 ，通过在Transwell上层作育免疫细胞 ，并在下层添加刺激物质 ，可以模拟炎症反应或免疫细胞之间的相互作用。
● 神经生物学研究：Transwell可用于模拟神经元迁徙和轴突生长历程 ，研究神经发育和修复机制。例如 ，通过在Transwell上层作育神经细胞 ，并在下层添加趋化因子 ，可以评估神经元迁徙和轴突生长的能力。
● 细胞信号传导研究：Transwell可用于研究细胞间信号传导和细胞-细胞相互作用对细胞功效的调控。例如 ，通过在Transwell上层作育信号发出细胞 ，并在下层添加接受细胞 ，可以模拟细胞间的信号传导和相互作用。
● 药物筛选和药物透过性研究：Transwell可用于评估化合物的透过性和细胞摄取能力 ，以举行药物筛选和药物转达研究。例如 ，通过在Transwell上层作育细胞 ，并在上下层划分添加药物溶液 ，可以评估药物的透过性和细胞摄取情形。
