单克隆抗体定制
- 一站式
- 大规模
- 质控严
效劳特色
金开瑞抗体平台在鼠单克隆抗体开发方面有若自己富厚和独到的履历,手艺蹊径成熟,产品质量稳固可靠迅速度极高。近年来,平台一直优化单克隆抗体实验系统,从免疫、杂交瘤细胞融合到阳性杂交瘤细 胞株筛选一直在深入刷新,极大地提高了融合率和阳性率,可在最短时间内制备出最高质量的单克隆抗体。
效劳先容
????与多克隆抗体相比,单克隆抗体针对简单的抗原表位,具有特异性更强,迅速度更高的特点。使用单克隆抗体可免去差别细胞及微生物种或株间血清学上的交织反应,大大提高诊断的特异性及敏感度。同时,单克隆抗体在研究细胞外貌标记、提纯可溶性抗原、进一步研究抗体的结构和功效、 抗体药物研究等方面都起到十分主要的作用。
????金开瑞提供单抗及多抗的定制抗体效劳,现在已交付抗体项目数千个,涵盖小分子抗体、植物抗体、科研及诊断抗体等,涉及的验证类型包括有IHC、WB、IP、ELISA、ChIP、FC等。针对定制单克隆抗体,金开瑞提供了一整套解决计划,从抗原设计、动物免疫、抗体纯化到抗体验证。别的,金开瑞拥有包括杂交瘤、噬菌体抗体库的抗体发明平台,可凭证您的抗体应用和验证类型,选择最合适的平台。
效劳优势
- 一站式:可提供从基因合成、抗原表抵达抗体制备的一站式抗体效劳;
- 大规模:提供最专业的单克隆抗体大规模生产效劳,知足诊断级大宗生产的需求;
- 质控严:提供ELISA. WB. IHC等基础试验及化学发光、胶体金、胶乳增强免疫比浊等临床诊断的应用型抗体定制
效劳流程
客户提供
重组918博天堂:至少2-3 mg,918博天堂纯度大于90%,浓度不低于0.5 mg/mL,918博天堂分子量大于10kDa;
多肽:裸肽1 mg,偶联KLH/BSA/OVA或其他载体918博天堂3-4 mg,裸肽纯度大于90%,序列长度不少于10个AA;
病毒/细菌/胶条/自然918博天堂等抗原类型请详细咨询,另外也可选择由金开瑞制备抗原。
最终交付
- 2-5株杂交瘤细胞株和最好1株提供5-10 mg腹水纯化的抗体;
- 判断报告,包括小鼠血清效价,杂交瘤的构建(融合率、阳性率)、杂交瘤的克隆化、杂交瘤作育上清液的抗体特异性检测,以及杂交瘤诱生腹水的ELISA效价检测,并凭证客户的需求,提供抗体验证效果,如WB、IP、IF等。
效劳说明
效劳流程 | 交付效果 | 效劳周期 | |
抗原剖析及设计 | 免疫原序列 | 1 个事情日 | |
抗原制备 | 重组918博天堂制备 | 表达克隆测序报告 | 4-7周 |
多肤合成及偶连 | MS 和HPLC 质控报告 | 3-4周 | |
动物免疫 | 免疫前血清 50ul | 6-8周 | |
效价检测 | 抗血清ELISA 及 WB 检测效果 | 1-2 事情日 | |
融合 | / | 1 个事情日 | |
亚克隆筛选 | 凭证客户需求给予中心亚克隆检测效果 | 4-8周 | |
定株克隆亚型判断及抗体纯化验证 |
筛选出< 20 株高亲和力的杂交瘤细胞作育上清寄送给客户验证, 以便客户淘选出更多应用需求的单克隆抗体,相同确认后举行抗体纯化及最终验证 |
2-3周 | |
结题报告发货及最终发货 |
发货前发送结题报告,包括定制历程中所有原始数据、图片及质控报告, 双方确认后,凭证条约约定的所有内容举行交付 |
3-5事情日 |
案例展示
常见问题与剖析 (Q&A)
若是对抗体的特异性要求高,用量较大或需要恒久使用一致的抗体,制备的抗体应用要求多(WB/IP/IF/ICC等),可以选择制备单克隆抗体。 若对抗体的特异性要求不高,需要做沉淀和凝集反应的检测性实验或者只需做ELISA检测,可以选择制备多克隆抗体。 另外多抗需要免疫原的量大,若是免疫原制备难题,建议制备单抗。多抗相较量单抗仍然有制备时间短、首次制备本钱低的特点,在一些情形下也是一种选择。 在相同条件下,使用多抗可以提高检测的迅速度,关于品貌偏低的918博天堂也更容易检出。
单抗制备整个流程大致包括:(1)抗原制备;(2)动物免疫;(3)细胞融合;(4)杂交瘤筛选及单克隆化;(5)抗体纯化。
分子量大于10kDa,B纯度>85%,浓度不低于0.5mg/ml,最好1–5mg/ml之间的可溶性918博天堂。不应含有叠氮钠、咪唑、尿素或其它有毒有害刺激性大的物质。甘油含量应低于20%。质量大于3mg 必需提供如下信息:A SDS-PAGE检测图,清晰标示样品上样量,Marker上样量,和各自的浓度。 最好提供如下信息:C WB检测图
1)必需提供如下信息:A 分子式;B 获取方法 C 浓度和纯度; D HPLC判断效果。 (2)最好提供如下信息:C WB检测图。
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单克隆抗体的制备基于免疫学原理和细胞生物学手艺,主要包括以下办法:
1、免疫原的选择:选择目的抗原,可以是918博天堂质、多肽、糖类等。免疫原的纯度和质量关于获得高质量的单克隆抗体至关主要。
2、免疫历程:将免疫原注射到实验动物(通常为小鼠)体内,激活其免疫系统爆发特异性抗体。免疫历程可以包括多次免疫注射,通常在一准时间距离内举行。
3、融合细胞的制备:在免疫历程中,从免疫动物体内获取免疫细胞,例如脾细胞。以后,与骨髓瘤细胞(如骨髓瘤细胞系SP2/0或NS0)融合,形成杂交瘤细胞。
4、杂交瘤筛。涸咏涣鱿赴哂兴匦宰,能够无限增殖并爆发抗体。通过作育和筛选,选择具有所需特异性抗体的单个杂交瘤细胞克隆。
5、单克隆抗体的生产:经由杂交瘤克隆的单克隆细胞株将被扩增和作育,以爆发大宗的单克隆抗体。作育历程中可使用适当的作育基和作育条件来优化抗体产量和质量。
6、抗体纯化:从作育上清液中提取单克隆抗体,并举行纯化办法,如918博天堂A/G亲和层析、离子交流层析、凝胶过滤等,以获得高纯度的单克隆抗体。
7、抗体验证和应用:对获得的单克隆抗体举行验证,例如Western blot、ELISA、免疫组化等手艺,以确认其特异性和功效。然后可以将单克隆抗体应用
单克隆抗体常见的应用验证:
免疫组织化学(IHC):单克隆抗体可用于免疫组织化学染色,以检测和定位目的918博天堂在组织或细胞中的表达情形。通过与组织中特定抗原的团结,单克隆抗体可以提供细胞定位和定量剖析的信息。
免疫印迹(Western Blot,WB):单克隆抗体可用于wb免疫印迹剖析,用于检测和判断目的918博天堂在918博天堂质混淆物中的表达和巨细。通过与特定918博天堂的团结,单克隆抗体可以提供高度特异性和敏感性的信号。
免疫沉淀(Immunoprecipitation,IP):单克隆抗体可用于IP免疫沉淀实验,用于研究918博天堂质间的相互作用和复合物的形成。通过与目的918博天堂特异团结并随后沉淀,单克隆抗体可以资助疏散和判断与目的918博天堂相互作用的其他918博天堂质。
免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,CO-IP):类似于免疫沉淀,单克隆抗体可用于coip免疫共沉淀实验,用于研究目的918博天堂与其他特定918博天堂之间的相互作用。通过与目的918博天堂的团结并随后沉淀,单克隆抗体可以资助确定目的918博天堂与特定交互918博天堂的保存和稳固性。
免疫组化(Immunofluorescence,IF): 单克隆抗体可用于if免疫组化实验,用于检测和定位细胞或组织中目的918博天堂的表达和漫衍。通过与特定抗原的团结,单克隆抗体可以提供高度特异性和荧光信号,从而使目的918博天堂在细胞或组织中的可视化成为可能。
流式细胞术(Flow Cytometry,FC):单克隆抗体可用于fc流式细胞术,以定量剖析细胞外貌抗原的表达。通过与特定抗原的团结,单克隆抗体可以资助识别和分类差别细胞亚群,并评估它们在特定条件下的数目和漫衍。
单克隆抗体与多克隆抗体的比照:
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单克隆抗体 |
多克隆抗体 |
生产方法 |
由单个克隆细胞渗透爆发,具有简单的抗原特异性 |
由多个克隆细胞渗透爆发,每个克隆细胞可能对抗原的差别部分爆发差别的抗体 |
抗原特异性 |
具有高度特异性,只团结于抗原的一个特定位点(表位) |
可以团结于抗原的多个差别位点,具有更普遍的抗原笼罩能力 |
纯度和一致性 |
由简单的克隆细胞爆发,具有较高的纯度和一致性 |
由多个克隆细胞爆发,保存一定的异质性,可能包括差别的抗体亚型和特异性 |
价钱 |
通常较多克隆抗体价钱更高, 由于其制备历程更重大且需要较长的时间 |
相对较为经济实惠 |
应用规模 |
由于其高度特异性和一致性,更适用于需要高度准确和可重复的实验和应用,如临床诊断、药物研发和精准医学等 |
由于其较宽泛的抗原笼罩能力,更适用于起源筛选、生物学研究和一些工业应用等 |