基因合成
- 工艺更稳固
- 周期更短
- 价钱更实惠
效劳特色
金开瑞自主研发的无引物基因合成以及非PCR基因合成手艺,突破古板基因合成手艺的局限,可合成您感兴趣的恣意DNA序列,为您提供准确,快速,优质的全基因合成效劳。
效劳先容
基因合成是指使用化学要领将一段完整的DNA序列合成成一条完整的DNA分子的历程,通常通过毗连短的寡核苷酸序列逐步合生长链DNA;蚝铣墒忠湛梢云局ば枨笊杓坪铣砂918博天堂质编码序列、RNA滋扰分子、基因表达调控元件等种种功效元件。这项手艺在现代生命科学、医学研究、生物制药等领域都有着普遍的应用,可以为研究职员提供一种快速、高效的合成DNA分子的要领,为基因工程和基因组学研究提供了有力支持。
效劳优势
- 自主研发的超长识别序列核酸内切酶能准确切割双链DNA,且酶切位点可以凭证要求定制,可用于基因大片断的组装,为合成生物学又添一件利刃。
- 自主研发的超低反应温度多段重组酶,反应、转化均可在冰上举行,真正实现“One Step”。
- 新手艺工艺更稳固,周期更短,价钱更实惠。
效劳流程
客户提供
基因序列或918博天堂质氨基酸序列
最终交付
- 约4 ?g含有目的片断的高纯度冻干质粒DNA;
- 含有重组质粒的穿刺菌或甘油菌一管(默认菌株为TOP10详细以样品管壁标签为准);
- 发货文件主要包括如下内容:测序效果、COA报告、sqd文件、seq文件。
效劳说明
效劳内容 | 基因长度 | 周期 |
基因合成 |
0~1kb |
7 |
1kb~2kb | 8-13 | |
2kb~3kb | 12-17 | |
3kb~4kb | 16-20 | |
4kb~5kb | 20-25 | |
5kb~6kb | 25-30 | |
大于6kb | 咨询 |
案例展示
相关资源
1、基因合成实验中涉及到的一些专属名词及释义
● 寡核苷酸:由较少数目的核苷酸单位组成的短链,常用作DNA合成历程中的引物。
● 固相合成:一种常用的DNA合成要领,其中DNA链在固相质料(通常是小颗粒)上逐渐构建,通过逐步添加单个核苷酸单位来举行。
● PCR(聚合酶链式反应):一种常用的DNA复制手艺,通过一直循环的变温办法,在体外扩增和复制目的DNA序列。
● 载体:用于将合成的DNA序列转移到细胞中的DNA分子。常见的载体包括质粒、病毒或合成的DNA片断。
● 克。航獶NA插入到载体中的历程,形成克隆DNA?寺】捎糜诶┰觥⑸暮脱芯刻囟ǖ腄NA序列。
2、涉及基因合成的实验举例
实验类型 |
使用基因合成的应用 |
合成可变区域(variable region)或全长重链和轻链的基因序列,以构建定制的抗体。 | |
双荧光素酶报告基因实验 |
构建包括双荧光素酶基因的报告基因载体,用于监测目的基因的表达水平和调控机制。 |
RNA滋扰(RNAi)实验 |
合成小滋扰RNA(siRNA)或小核苷酸发夹(shRNA),以抑制目的基因的表达。 |
CRISPR-Cas9基因编辑实验 |
合成CRISPR RNA(crRNA)和转录单位(tracrRNA),用于导向Cas9918博天堂靶向基因组中的特定位点,实现基因编辑和修饰。 |
918博天堂质标记实验 |
构建带有特定标签序列的918博天堂质表达载体,用于918博天堂质的纯化、定位和可视化,如融合标签(如His标签、GST标签)或荧光标签(如GFP标签)等。 |
克隆和表达实验 |
合成目的基因的DNA序列,并将其插入表达载体中,以实现目的基因的表达和爆发特定918博天堂质。 |
DNA纳米手艺实验 |
使用基因合成构建DNA纳米结构和纳米器件,用于生物传感、药物转达、分子盘算等应用。 |
基因组重编程实验 |
合成和设计基因组的刷新,以研究基因组的功效、调控和重编程。 |
3、基因合成中用于设计、剖析和操作合成的工具简介
工具 |
功效 |
ApE (A plasmid Editor) |
用于DNA序列编辑和剖析的免费软件,可以举行序列标记、限制酶切位点剖析、引物设计等。 |
SnapGene |
用于DNA序列设计、剖析和模拟的商业软件,提供直观的界面和许多适用功效,如序列编辑、PCR模拟、918博天堂质序列注释等。 |
Vector NTI |
商业软件套件,用于DNA序列设计、剖析和操作。它提供了多种工具,包括序列比对、引物设计、限制酶切位点剖析等 |
Serial Cloner |
免费的DNA序列编辑和剖析软件,提供基本的序列操作和剖析功效,如序列标记、PCR引物设计、限制酶切位点剖析等。 |
Primer3 |
用于设计PCR引物的普遍使用的免费在线工具,凭证给定的参数和目的序列自动设计引物。 |
OligoAnalyzer |
用于评估DNA或RNA序列的理化特征和引物设计的免费在线工具?梢哉雇锏娜芑露取C含量、二级结构和互补性等参数。 |
BLAST (Basic Local Alignment Search Tool) |
用于序列比对和相似性搜索的免费在线工具,可以在数据库中搜索与给定序列相似的序列。 |
EMBOSS (European Molecular Biology Open Software Suite) |
提供一系列免费的生物信息学工具,用于DNA序列剖析,如ORF展望、限制酶切位点剖析、序列比对等。 |
UCSC Genome Browser |
提供基因组序列和注释的在线浏览器,可以检索和剖析种种物种的基因组信息。 |
Benchling |
商业化实验室操作平台,用于设计、剖析和操作DNA序列。提供了多种适用功效,如序列编辑、引物设计、限制酶切位点剖析、克隆等。 |
4、基因合成失败及缘故原由剖析
①合成产品不保存/未扩增乐成:
● 引物设计问题:引物序列选择不当,导致与目的序列不特异团结。
● 引物合成问题:引物质量不佳,包括错配、缺失或杂质。
● PCR条件问题:PCR反应条件不准确,如温度、时间和酶浓度等。
②扩增产品保存杂交/非特异性扩增:
● 引物设计问题:引物与其他非目的序列保存非特异性团结。
● 目的序列重大性问题:目的序列具有高度变异性或重大结构,导致引物无法特异性团结。
③扩增产品保存多个带或模糊带:
● 引物设计问题:引物选择不当,导致非特异性扩增或引物间的非特异性团结。
● 目的序列问题:目的序列保存拷贝数变异或基因组重复区域,导致扩增产品不明确或杂交特异性差。
④扩增产品偏低/低效:
● 引物设计问题:引物长度不对适或GC含量偏高或偏低,影响引物的特异性和扩增效率。
● PCR条件问题:PCR反应条件不适当,如温度、时间和酶浓度等。
● 目的序列问题:目的序列可能具有重大结构或高度变异性,使扩增难题。
⑤引物降解或污染:
● 引物贮存问题:引物贮存条件不当,如袒露在高温或湿度情形下,导致引物的降解和损坏。
● 污染问题:实验操作中引物、试剂或反应管的污染,影响扩增效果。