实验原理
RIP手艺(RNA Binding Protein Immunoprecipitation,RNA团结918博天堂免疫沉淀),是研究细胞内RNA与918博天堂团结情形的手艺,是相识转录后调控网络动态历程的有力工具。该手艺主要是运?目的蛋?的特异性抗体把响应的RNA-918博天堂复合物沉淀下来,然后经由疏散纯化对团结在复合物上的RNA举行q-PCR验证或者高通量测序剖析。
实验流程
试剂盒组分
常见问题
Q1:怎样判断RIP实验乐成?
RIP后WB检测IP组和input组检测到目的918博天堂信号即判断RIP实验乐成。
Q2:IP和IgG样本Ct值没有差别
多方面缘故原由造成:
1.抗体没有富集到RNA,可替换抗体实验;
2.IgG配景过高,可增添洗涤次数或镌汰免疫沉淀办法RNA投入量。
Q3:消融曲线异常
泛起非特异扩增或有引物二聚体等情形,需重新设计引物。
Q4:拉下样本RNA浓度过低
1.样本投入量过少,思量增添样本初始投入量。
2.裂解不完全,组织样本未研磨充分,或者用强裂解液举行裂解。
相关产品
⇒ 银染试剂盒(Silver Stain Kit) ⇒ Co-IP试剂盒(植物)
⇒ DNA pull-down试剂盒(动物) ⇒ DNA pull-down试剂盒(植物)
相关手艺效劳
? 双荧光素酶报告系统 ? 酵母双杂交 ? EMSA ? RNA pull-down
? RIP-qPCR ? DNA pull-down ? ChIP-qPCR ? 酵母单杂交