实验原理
萤火虫荧光素酶(firefly luciferase)和海肾萤光素酶(Renila luciferase)可划分催化荧光素(luciferin)或腔肠素(coelenterazine)氧化形成oxyluciferin或coelenteramide,并在此历程中爆发生物荧光。Double-Luciferase Reporter Assay Kit首先以荧光素为底物检测萤火虫荧光素酶报告基因的活性,之后在淬灭该荧光反应的同时,以腔肠素为底物检测海肾荧光素酶报告基因的活性,具有检测迅速、迅速度高、检测规模广、无细胞内源活性滋扰等特点。
常见问题
Q:试剂盒在使用历程中有哪些注重事项?
A:Luciferase Reaction Buffer Ⅱ在消融历程中可能有部分沉淀析出,使?前应充分需荡或将其置于37℃水浴锅中,包管其完全消融后再使用。
Luciferase Reaction Reagent和Luciferase Reaction Reagent Ⅱ反应前需平衡至室温。
为包管实验数据准确可靠,建议丈量大宗样品时使用排枪添加Luciferase Reaction Reagent和Luciferase Reaction Reagent Ⅱ,使用历程中务必注重排枪各孔吸收的液体是否一致。
Luciferase Reaction Reagent和Luciferase Reaction Reagent Ⅱ均易爆发氧化反应,请合理安排实验,阻止样品解冻后在室温下长时间安排。